大組織透明化樣品可以通過懸掛的方式放置在樣品載物臺上,樣品大尺寸是1cm*1cm*1cm。
適合樣品:水溶性試劑透明化的小鼠胚胎、腦、肺、肝臟、腎臟、胰腺、卵巢等。
上樣方式:平臺配有不同形式的樣品粘托和樣品托盤,可以將樣品通過粘貼懸掛或者托掛的方式放置在載物臺上,沒有固定形式,大家集思廣益。
由于高濃度的瓊脂糖濃度會影響部分活體樣本的發(fā)育和狀態(tài),瓊脂糖濃度太低又會影響樣品的穩(wěn)定性,此時,我們可以選擇將樣品圍封在FEP管中。
適合樣品:折射率和FEP、瓊脂糖相似的樣品,如斑馬魚、果蠅、線蟲、擬南介等。
樣品大?。浩脚_配有不同規(guī)格的FEP管,具體圍封方式類似于包埋方式。
圍封樣品模式圖
掃描電鏡圖像的形成需要各個系統(tǒng)相互配合,電子光學(xué)系統(tǒng)為掃描電鏡提供的電子束,信號探測系統(tǒng)將電子束與樣品相互作用產(chǎn)生的信號進(jìn)行采集與處理。電子光學(xué)系統(tǒng)內(nèi)容請參考往期文章,本篇主要對掃描電鏡的信號探測系統(tǒng)進(jìn)行介紹。
掃描電鏡可以采集多種不同類型的信號用于成像和分析,其中二次電子(SE)和背散射電子(BSE)信號是基本也是常見的兩種信號類型。
不同廠家和型號的電鏡在采集SE,BSE信號時所用的探測器都具有各自特的技術(shù),但旁置式二次電子探測器和極靴下背散射電子探測器在架構(gòu)和工作原理方面相對固定,應(yīng)用也很廣泛,因此本文只會對旁置式二次電子探測器和極靴下背散射電子探測器進(jìn)行介紹。
蔡司熱場發(fā)射掃描電子顯微鏡SIGMA 500采用Gemini電子束非交叉光路設(shè)計,突破了傳統(tǒng)設(shè)計中電子束交叉三次造成能量擴(kuò)散的限制。束流適中,大大降低了色差對成像質(zhì)量的影響。鏡頭鏡筒內(nèi)置電子束加速器,無需切換減速模式即可實現(xiàn)的低電壓成像。低20V可成像,樣品類型不受限制。透鏡鏡筒物鏡采用靜電透鏡和電磁透鏡相結(jié)合的方式,在工作距離范圍內(nèi)沒有磁場,可在高倍率下觀察磁性材料。環(huán)形二次電子探測器In-Lens安裝在鏡筒的正光路上。圓柱形一體化超大樣品室配備5軸全自動中心樣品臺,可容納直徑250mm的超大樣品。同一品牌的電子顯微鏡和光學(xué)顯微鏡可以組合觀察(可選),只有一個通用的樣品架和配套的軟件是Shuttle&Find,可以充分發(fā)揮光鏡和電子鏡各自的優(yōu)勢
使用全新樣品定位方法創(chuàng)建多視角( Multiview) 數(shù)據(jù)
使用折射率 n=1.38 的 Scale 介質(zhì)(Hama 等,Nat Neurosci 期刊,2011 年),或折射率 n=1.45 的水性澄清液(例如:CelExplorer Labs 公司生產(chǎn)的 FocusClear? 產(chǎn)品)進(jìn)行透明處理的組織來完成實驗
使用可選的觸發(fā)界面維持生理條件,充分發(fā)揮成像信息和環(huán)境條件控制兩者相結(jié)合的優(yōu)勢
光透技術(shù)